关于 大肠杆菌的传代
疑问：我们厂在进行GMP认证，我想问一个有关微生物的问题：
从省药检所刚买了一只斜面大肠杆菌(Escherichia coli)菌种，如果一个月传代一次，那么一般传多少代后原菌种（从省药检所买的那只）报废；还有第一次传代一般传几只，是不是多传一些好？在做微生物限度时，是不是用生理盐水（0.9%）稀释成对照菌液，一般保存一个月？
回复1：你可以把那一代次的扩大培养一些，然后冻存，就有效的解决传代次数太多报废问题。一般第一次传代，需要传3代，并不需要传的越多越好。基本上传3代以后细菌以及基本适应了环境，对实验影响就会小了。出代次数过多，导致耐药行以及毒力的改变，也不是好事。
回复2：可以分批冻存，用时拿一点出来，这样可以避免传代过多！
回复3：有些菌株如XLI-Blue、JM系统的可以在传代的过程添加四环素进行筛选，从而淘汰突变型个体。
回复4：传代次数过多，导致耐药行以及毒力的改变。如果你想长期保留此菌种，你可以按照下面的方法保存（可保存很长时间）：细菌培养液0.5ml + 30%甘油0.5ml，于-20或-80摄氏度长期保存。
PhD高压均质机：最高操作高压力为30000psi/207Mpa, 可广泛用于酵母菌破碎、细菌破碎、放线菌破碎、真菌破碎、动物细胞破碎、转基因细胞破碎、杂交瘤破碎、植物种子破碎、动植物病毒破碎、噬菌体破碎、大肠杆菌破碎、结核杆菌破壁、丝状真菌破碎、Vero细胞破碎、植物细胞破碎、藻类破碎提取、胞内蛋白及核酸、质粒和基因文库等等生物学、生命科学领域。
另外，PhD高压均质机，还可广泛应用于多种纳米材料、固液混悬剂、纳米化合物、动物/植物组织提取物、脂质体、脂肪乳、脂微球、纳米乳剂、纳米粒、SLN、微乳等纳米均质领域，均质后样品粒度可≤100nm,且分布均匀，样品稳定性强。
即该高压均质机，除用于生物学、生命科学领域，还可用于药学、农学、环境材料学、化工等领域，方便实现多个学科共享。
PhD中国办事处，专业承担高压均质机、过滤挤出器的各项服务工作：安装调试、培训、售后服务、技术支持等。人员配备方面，有固定的专业工程师，用心服务于高压均质机、过滤挤出器的用户，使用户无后顾之忧。